肥达实验与外斐试验的临床应用

  敏感性和特异性通常是一对矛盾，且快速、敏感性高且特异性好的检测的新方法是临床和检验人员追求的共同目标。

  菌体抗原“O”和 鞭毛抗原“H”——抗原性较强，可刺激机体产生相应抗体，有助于诊断

  （3）一种血清凝集反应，用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙、丙型副伤寒杆菌H抗原，测定患者血清中相应抗体

  （4）“O”抗原为伤寒、副伤寒甲、乙杆菌的共同抗原，三者的鞭毛抗原（“H”、“A”、“B”）不同

  “O”抗体(IgM)-出现早，消失快；“H”抗体(IgG)-出现迟，维持时间长

  假阴性：早期应用抗生素；营养不良者；抗体免疫功能缺陷者；免疫功能尚未完善的幼儿

  假阳性：其他疾病，如血吸虫，败血症，结核，传染性肝炎，结缔组织病，肿瘤，溃疡性结肠炎等

  伤寒临床六大特征：持续发热、相对缓脉、全身中毒症状、玫瑰疹、肝脾肿大、白细胞减少

  大小介于细菌与病毒之间，呈多形球杆状，Gram染色阴性，Giemsa染色紫色，寄生于真核细胞内，生物特性接近细菌，胞壁的脂多糖层有内毒素样作用

  （2）变形杆菌用与立克次体有共同菌体抗原，进行非特异性凝集反应，检测病人血清中有无立克次体抗体

  普氏立克次体：OX19凝集价≥1:160或病程中上升4倍以上，阳性率70-80%

  莫氏立克次体：OX19凝集价低滴度升高，阳性率70-85%（进一步诊断依赖于补体结合试验和立克次体凝集试验）

  ：OXK凝集价≥1:160或早晚期双份血清效价上升4倍以上，最早第4天出现阳性，3-4周达峰

  O高H不高——感染早期或与其他伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。

  肥达氏反应是一种凝集反应，1896年由法国医师肥达（Widal）建立并用于临床，故名。用已知的伤寒沙门菌鞭毛（H）、菌体（O）抗原和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌H抗原，与待测血清作试管或微孔板凝集试验，以测定血清中有无相应抗体存在，用于辅助诊断伤寒和副伤寒。

  机体感染伤寒、副伤寒沙门菌后会产生相应抗体，正常人因隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量的抗体。一般当H≥1∶160，O≥1∶80，副伤寒凝集价≥1∶80时，才有诊断意义。肥达反应必须动态观察，病程中应每周复查一次，如病人H与O的凝集价均高于参考值或较原凝集价升高4倍以上，则患伤寒的可能性很大。若H凝集价高而O低于正常值，则可能是以往预防接种疫苗的结果或非特异性回忆反应所致。肥达氏试验受影响因素较多，存在特殊的比例假阴性和假阳性。故对结果的判断要综合分析，肥达试验阴性，亦不能排除患伤寒或副伤寒的可能。

  作为临床医师要结合血液、骨髓和粪便培养结果来综合分析判断。虽然肥达氏反应操作繁琐，敏感度不是很高，但作为经典的免疫学检测的新方法，目前仍在临床应用（可能某些地区应用较少），暂无替代方法。

  肥达氏反应主要是诊断伤寒杆菌的一种方法，其准确性较低，假阳性略高，但其操作方便。替代方法较多：

  伤寒的实验室诊断最经典的方法是肥达反应，已有100多年历史, 始终伴随着争议。以往由于条件所限，肥达反应是疑似病例诊断为伤寒的唯一的实验室手段。但肥达反应存在诸多问题，在诊断上不敏感不特异，已表现出显著的局限性，需要改用其他检测的新方法以克服肥达反应在检测特异性和灵敏度、以及检测时限上存在的问题。比如ELISA办法能够代替肥达反应来监测血清中抗原或抗体，是一种相对既灵敏又特异的诊断方法；还有别的一些商品化的IgM抗体检测试剂盒，包括Tubex test、Typhidot/Typhidot-M、IgM Dipstick等，其敏感性和特异性均优于肥达反应。

  但血清学方法存在共同的缺点，即存在很明显的交叉反应，原因与沙门菌属基因组90%以上为共有，拥有很多共同抗原有关。因此，在现场条件不容许使用培养或肥达反应的地方，一些简单的血清学方法可能有用武之地，只是方法特异性低的问题还要进一步解决。

  分离培养法是最基本也是诊断伤寒病例的金标准。培养所用的标本可有骨髓、血液、粪便和尿液。由于培养方法受标本采集时机和抗生素应用的影响，阳性率会大幅度的降低，而且培养所需时间比较久，因此该方法存在明显不足，但可为预防控制，预测伤寒的流行趋势，菌株的进化关系等提供基础资料。

  PCR检测标本中的伤寒沙门菌核酸，是目前公认最为敏感和特异的诊断方法。但PCR方法容易受污染影响，另外，伤寒和甲型副伤寒沙门菌是胞内寄生菌，抗生素的滥用加剧了血液中细菌数量的减少，制备DNA模板过程中样品的损失增加PCR扩增的难度，其特异性和敏感性目前仍存有争议。

  敏感性和特异性通常是一对矛盾，且快速、敏感性高且特异性好的检测的新方法是临床和检验人员追求的共同目标。对发热待诊患者进行伤寒相关实验诊断较敏感、特异的方法，除肥达氏外，有沙门氏菌测试片、骨髓培养法、沙门氏显色培养基法。